Efeito de soluções contendo hexametafosfato de sódio e quercetina, associados ou não ao fluoreto, sobre o desgaste erosivo dentinário in vitro / Effect of sodium hexametaphosphate and quercetin, associated or not with fluoride, on dentin erosion in vitro

O objetivo do presente estudo foi investigar o efeito de soluções contendo fluoreto (F), hexametafosfato de sódio (HMP) e quercetina (QC), sozinhos ou em associação, sobre a erosão dentinária e sobre a inibição de metaloproteinases da matriz (MMPs) -2 e -9, em protocolos in vitro. Blocos de dentina radicular bovina (4 × 4 × 2 mm; n = 96), selecionados por dureza superficial, foram aleatoriamente divididos em 8 grupos experimentais (n = 12/grupo) e tratados 2×/dia (um minuto) com as seguintes soluções: (1) água deionizada (controle negativo); (2) 1100 ppm F ("F"); (3) 1,0% HMP ("HMP"); (4) 0,03% QC ("QC"); (5) F+HMP; (6) F+QC; (7) HMP+QC; e (8) F+HMP+QC. Os blocos foram submetidos a desafios erosivos 4×/dia, por 5 dias (exposição dinâmica a ácido cítrico 50 mmol.l-1 , pH 3,2, 90 s). Em seguida, foram analisados quanto à perda dentinária (perfilometria) e à perda de dureza integrada em profundidade (área sob a curva, ∆KHN). O potencial antiproteolítico das soluções contendo F, HMP e/ou QC foi analisado por zimografia. Os dados de perda dentinária (log10) foram submetidos a ANOVA um critério, seguido do teste de Tukey. Os resultados de ∆KHN (dados brutos) foram submetidos a ANOVA dois critérios, medidas repetidas, seguido do teste HolmSidak (p< 0,05). O menor desgaste erosivo foi observado no grupo F+HMP+QC. Nas menores profundidades (5-30 µm), os blocos tratados com a solução contendo F+HMP+QC apresentaram os maiores valores de ∆KHN. A análise zimográfica mostrou que todos os tratamentos promoveram atividade antiproteolítica total da MMP-2, com exceção da QC administrada sozinha (inibição de 77%). Para MMP-9, todas as soluções contendo HMP e a associação de F+QC apresentaram atividade antiproteolítica total. Conclui-se que a adição de HMP e QC a soluções contendo F levou a uma maior proteção contra a erosão dentinária, tanto em superfície (perda dentinária) quanto em relação ao conteúdo mineral do tecido remanescente (∆KHN), além de promover uma completa inibição da atividade de MMPs -2 e -9 in vitro(AU)

The aim of the present study was to investigate the effect of solutions containing fluoride (F), sodium hexametaphosphate (HMP) and quercetin (QC), alone or in association, on dentin erosion and on the inhibition of matrix metalloproteinases (MMPs) - 2 and -9, using in vitro protocols. Bovine root dentin blocks (4 × 4 × 2 mm; n = 96), selected by surface hardness, were randomly divided into 8 experimental groups (n = 12/group) and treated 2×/day (one minute) with the following solutions: (1) deionized water (negative control); (2) 1100 ppm F ("F"); (3) 1.0% HMP ("HMP"); (4) 0.03% QC ("QC"); (5) F+HMP; (6) F+QC; (7) HMP+QC; and (8) F+HMP+QC. Blocks were submitted to erosive challenges 4×/day for 5 days (dynamic exposure to 50 mmol.l-1 citric acid, pH 3.2, 90 s). They were then analyzed for dentin loss (profilometry) and integrated hardness loss in depth (area under the curve, ∆KHN). The antiproteolytic potential of solutions containing F, HMP and/or QC was analyzed by zymography. Dentin loss results (log10 transformed) were submitted to one-way ANOVA, followed by Tukey's test. ∆KHN data (raw) were submitted to two-way, repeated-measures ANOVA, followed by the Holm-Sidak test (p< 0.05). The lowest dentin erosive wear was promoted by F+HMP+QC. At the lowest depths (5-30 µm), blocks treated with F+HMP+QC showed the highest values of ∆KHN. Zymography analysis showed that all treatments completely inhibited MMP-2 activity, except for QC administered alone (77% inhibition). For MMP-9, all the solutions containing HMP or the association of F+QC promoted total antiproteolytic activity. It was concluded that the addition of HMP and QC to F solutions led to greater protection against dentin erosion, both at the surface (dentin loss) and in relation to the mineral content of the remaining tissue (∆KHN), in addition to promoting a complete inhibition of MMPs -2 and -9 activity in vitro(AU)

Efeitos de nanopartículas de hexametafosfato de sódio, associadas ou não ao fluoreto, em biofilmes mistos de Streptococcus mutans e Candida albicans e em biofilmes microcosmos / Effects of sodium hexametaphosphate nanoparticles, combined or not with fluoride, on dual-species biofilms of Streptococcus mutans and Candida albicans and on microcosm biofilms

O presente estudo avaliou os efeitos de nanopartículas de hexametafosfato de sódio (HMPnano), associadas ou não ao fluoreto (F), na composição orgânica (Subprojeto 1- S1) e inorgânica (Subprojeto 2-S2) de biofilmes mistos de Streptococcus mutans e Candida albicans formados in vitro; e na viabilidade celular e atividade metabólica de biofilmes microcosmos derivados de saliva (Subprojeto 3-S3). Em S1 e S2, soluções de HMPnano ou HMP microparticulado (HMPmicro) foram preparadas a 0,5% ou 1%, com ou sem F (1100 ppm F, NaF), além de 1100 ppm F (controle positivo) e saliva artificial (controle negativo). S. mutans e C. albicans foram cultivados em saliva artificial. Os biofilmes foram formados no fundo de poços de placas de microtitulação e tratados 72, 78 e 96 horas após o início da formação, por 1 minuto. Em S1, após o último tratamento, realizou-se análises de quantificação das unidades formadoras de colônias (UFCs), produção de biomassa total, atividade metabólica, além da composição da matriz extracelular dos biofilmes e avaliação estrutural. Observou-se que 1% de HMPnano combinado ao F levou aos menores UFCs de S. mutans, bem como às menores concentrações de carboidratos da matriz extracelular dos biofilmes, além de afetar substancialmente a sua estrutura. Em S2, após o último tratamento, avaliou-se o pH e a composição inorgânica dos biofilmes (análise das concentrações de F, cálcio (Ca) e fósforo (P)), antes e após exposição a sacarose. Soluções contendo 1% HMPnano combinado ao F promoveram os maiores valores de pH dos biofilmes, mesmo após exposição à sacarose. Além disso, 1% HMPnano promoveu maiores concentrações de P, enquanto que o HMP (micro/nano, com/sem F) levou a concentrações inexpressivas de Ca no fluido do biofilme. Em S3, os efeitos do HMPmicro ou HMPnano, sozinhos ou associados ao F, foram avaliados em biofilmes microcosmos derivados de saliva. Os biofilmes foram formados sobre discos de vidro por 24 h e, em seguida, S. mutans (C180- 2) foi incorporado ou não aos biofilmes. A partir deste momento, os mesmos ativos avaliados em S1/S2 foram adicionados ao meio de cultura, a 20% das concentrações utilizadas nesses subprojetos. Após 96 h de formação, foram determinadas as UFCs totais e de S. mutans, e avaliada a produção de ácido láctico pelos biofilmes. Todos os meios de cultura contendo contendo HMP levaram às menores concentrações de ácido láctico e às maiores reduções de UFCs totais e de S. mutans dos biofilmes, sem influência do tamanho da partícula de HMP, associação com F ou adição de S. mutans. Conclui-se que o HMPnano a 1%, associado a 1100 ppm F, promoveu uma diminuição substancial no metabolismo de biofilmes mistos de S. mutans e C. albicans, e da viabilidade de S. mutans. Esta combinação também levou a valores de pH mais próximos do neutro, além de afetar a composição inorgânica destes biofilmes. Para biofilmes microcosmos, o HMP promoveu a diminuição da viabilidade microbiana e acidogenicidade, sem influência, entretanto, do tamanho da partícula de HMP e da presença de F(AU)

This study evaluated the effects of sodium hexametaphosphate nanoparticles (HMPnano), combined or not with fluoride (F), on the organic (Subproject 1-S1) and inorganic (Subproject 2-S2) compositions of dual-species biofilms of Streptococcus mutans and Candida albicans formed in vitro; and on the cell viability and metabolic activity of saliva-derived microcosms biofilms (Subproject 3-S3). In S1 and S2, solutions containing HMPnano or conventional/micrometric HMP (HMPmicro) were prepared at 0.5 or 1%, combined or not with F (1,100 ppm F, as NaF). Also, a solution containing 1,100 ppm F and pure artificial saliva were tested as positive and negative controls, respectively. S. mutans and C. albicans strains were cultivated in artificial saliva. The biofilms were formed in well plates, and treated with the test solutions at 72, 78 and 96 from the beginning of the biofilm formation, for 1 minute. In S1, after the last treatment, the number of the colony-forming units (CFUs), production of total biomass, metabolic activity, composition of the extracellular matrix, and the structure of the biofilms were determined. HMP at 1% combined with F led to the lowest S. mutans CFUs and lowest concentration of carbohydrates from the extracellular matrix of the biofilms, besides substantially affecting biofilm's structure. In S2, after the last treatment, the pH and the inorganic composition of the biofilms (analysis of F, calcium (Ca), and phosphorus (P) concentrations), prior to and after sucrose exposure, were evaluated. Solutions containing 1% HMPnano combined with F led to the highest biofilm pH, even after exposure to sucrose. In addition, 1% HMPnano promoted the highest P concentrations, while HMP (micro/nano, with/without F) led to inexpressive Ca levels in the biofilm fluid. In S3, the effects of HMPmicro or HMPnano, alone or associated with F, were evaluated in salivaderived microcosm biofilms, which were formed during 24 h attached to glass coverslips. Thereafter, S. mutans (C180-2) was incorporated to the biofilms. From that timepoint onwards, the same actives analyzed in S1/S2 were added to the culture medium at 20% of the concentrations used in those subprojects. After 96 h of formation, total and S. mutans CFU-counting were determined, and the production of lactic acid was assessed. All HMP-containing culture media led to the lowest lactic acid concentrations, and to the highest reductions in total and S. mutans CFU counts, with no significant influence of HMP's particle size, association with F or the addition of S. mutans. In summary, it was concluded from S1 and S2 that 1% HMPnano combined with 1,100 ppm F substantially reduced the metabolism of S. mutans and C. albicans dual-species biofilms, besides reducing the viability of S. mutans. Also, this combination led to biofilm pH values closer to neutral ones, besides affecting their inorganic composition. From S3, HMP promoted reductions in the microbial viability and acidogenicity, without the influence, however, of HMP's particle size or the presence of F(AU)

Barniz polimerizable de vidrio ionómero modificado con resina "clinpro xt": una alternativa de tratamiento para la sensibilidad dentaria. Revisión sistemática de la literatura

Resumen Introducción: En respuesta a la sensibilidad dentinaria, se han desarrollado múltiples productos, entre ellos, Clinpro XT, barniz de vidrio ionómero modificado con resina fotopolimerizable con flúor, calcio y fosfato. Metodología: Se realizó una revisión sistemática de la literatura. La selección fue en base a título, resumen y texto completo de acuerdo a los criterios de inclusión y exclusión. Resultados: De 299 artículos, fueron seleccionados revisiones sistemáticas, metaanálisis, estudios in vivo e in vitro y 2 encuestas. Discusión: Clinpro XT reduce la permeabilidad dentinaria, ocluye túbulos dentinarios e inhibe su reapertura, aumenta la biodisponibilidad de minerales en saliva y promueve la remineralización del esmalte. Significando una mayor protección del esmalte y dentina de forma inmediata y a largo plazo. Conclusiones: Clinpro XT demostró disminuir la hipersensibilidad dentinaria incluso después 6 meses posterior a su aplicación.

Resumo Introdução: Em resposta à sensibilidade dentinária, foram desenvolvidos múltiplos produtos, incluindo Clinpro XT, um verniz de vidro de ionómero modificado com resina fotopolimerizável com flúor, cálcio, e fosfato. Metodologia: Foi realizada uma revisão sistemática da literatura. A selecção foi baseada no título, resumo e texto completo de acordo com os critérios de inclusão e exclusão. Resultados: De 299 artigos, revisões sistemáticas, meta-análises, estudos in vivo e in vitro e 2 inquéritos foram seleccionados. Discussão: Clinpro XT reduz a permeabilidade da dentina, oclui os túbulos dentinários e inibe a sua reabertura, aumenta a biodisponibilidade dos minerais na saliva e promove a remineralização do esmalte. O que significa uma maior protecção do esmalte e da dentina imediatamente e a longo prazo. Conclusões: Foi demonstrado que o Clinpro XT diminui a hipersensibilidade da dentina mesmo 6 meses após a aplicação.

Abstract Introduction: Multiple products have been developed to treat dentin sensitivity, including Clinpro XT, a lightcuring resinmodified ionomer glass varnish with fluoride, calcium, and phosphate. Methodology: A systematic literature review was conducted. The articles were selected based on title, abstract, and full text according to the inclusion and exclusion criteria. Results: Of 299 articles, systematic reviews, metaanalysis, in vivo and in vitro studies, and 2 surveys were selected. Discussion Clinpro XT reduces dentin permeability, occludes dentin tubules, inhibits their reopening, increases mineral bioavailability in saliva, and promotes enamel remineralization. This entails greater protection of enamel and dentin immediately and in the long term. Conclusions: Clinpro XT was shown to decrease dentin hypersensitivity even six months after application.

Cardiovascular mortality in peritoneal dialysis: the impact of mineral disorders / Mortalidade cardiovascular em diálise peritoneal: o impacto dos distúrbios minerais

Abstract Introduction: Mineral and bone disorders (MBD) are associated with higher mortality in dialysis patients. The main guidelines related to the subject, Kidney Disease Outcomes Quality Initiative (KDOQI) and Kidney Disease: Improving Global Outcomes (KDIGO), were elaborated based on published information from hemodialysis participants. The aim of our study was to evaluate the impact of calcium (Ca), phosphorus (P), and parathyroid hormone (PTH) (according to guideline ranges from KDOQI and KDIGO) on the cardiovascular mortality of peritoneal dialysis (PD) patients. Methods: We used the BRAZPDII database, an observational multi-centric prospective study, which assessed participants on PD between December 2004 and January 2011. Amongst 9,905 participants included in this database, we analyzed 4424 participants who were on PD for at least 6 months. The appropriate confounding variables were entered into the model. Serum levels of Ca, P, and PTH were the variables of interest for the purposes of the current study. Results: We found a significant association between high P serum levels, categorized by KDOQI and KDIGO (P above 5.5 mg/dL), and cardiovascular survival (p < 0.01). Likewise, a compelling association was found between lower levels of PTH, categorized by guidelines (KDOQI and KDIGO - PTH less than 150 pg/mL, p < 0.01), and cardiovascular survival. Conclusion: In conclusion, levels of P above and PTH below the values proposed by KDOQI and KDIGO were associated with cardiovascular mortality in PD patients.

Resumo Introdução: Os distúrbios minerais e ósseos (DMO) estão associados a maior mortalidade em pacientes de diálise. As principais diretrizes relacionadas ao assunto, Kidney Disease Outcomes Quality Initiative (KDOQI) e Kidney Disease: Improving Global Outcomes (KDIGO) foram elaboradas com base em informações publicadas de pacientes em hemodiálise. O objetivo do nosso estudo foi avaliar o impacto do cálcio (Ca), fósforo (P) e paratormônio (PTH) (de acordo com as faixas propostas pelas diretrizes do KDOQI e KDIGO) na mortalidade cardiovascular de pacientes em diálise peritoneal (DP). Métodos: Utilizamos o banco de dados BRAZPDII, um estudo prospectivo observacional multicêntrico, que avaliou participantes de DP entre dezembro de 2004 e janeiro de 2011. Entre os 9.905 participantes incluídos neste banco de dados, analisamos 4.424 que estavam em DP há pelo menos 6 meses. As variáveis de confusão apropriadas foram inseridas no modelo. Os níveis séricos de Ca, P e PTH foram as variáveis de interesse para os fins do presente estudo. Resultados: Encontramos uma associação significativa entre níveis séricos de P elevados, categorizados por KDOQI e KDIGO (P acima de 5,5 mg/dL), e sobrevivência cardiovascular (p < 0,01). Da mesma forma, foi encontrada uma associação convincente entre níveis mais baixos de PTH, categorizados por diretrizes (KDOQI e KDIGO - PTH inferior a 150 pg/mL, p < 0,01), e sobrevivência cardiovascular. Conclusão: Em conclusão, níveis de P acima e PTH abaixo dos valores propostos por KDOQI e KDIGO foram associados à mortalidade cardiovascular em pacientes de DP.

Síntese e caracterização de ciclotrifosfato de sódio contendo cálcio e seu efeito na prevenção da erosão do esmalte in vitro / Synthesis and characterization of calcium-containing sodium cyclotriphosphate and its effect on preventing enamel erosion in vitro

O objetivo do presente estudo foi sintetizar e caracterizar ciclotrifosfato de sódio (NaTMP) contendo cálcio, e verificar seu efeito utilizando modelo de lesões iniciais de erosão do esmalte. Os ciclotrifosfatos contendo cálcio (CaNaTMP) foram sintetizados utilizando coluna para cromatografia e adição de sobrenadante de solução contendo hidróxido de cálcio e analisados por meio de microscopia eletrônica de varredura e espectroscopia de raios-X por dispersão de energia. Para determinar o efeito sobre lesões erosivas iniciais, blocos de esmalte bovino sadios (n=96) foram selecionados por dureza de superfície inicial e divididos em 8 grupos experimentais (12 blocos/grupo): controle (água deionizada), 0,24% NaF (1100 ppm F), 0,25%, 0,5% e 1% de NaTMP e CaNaTMP nas mesmas concentrações. Os blocos de esmalte foram imersos em 4 mL das soluções experimentais durante 2 minutos, seguidos por 4 desafios erosivos (ácido cítrico, 0,75%, pH 3,5, por 1 minuto, sob agitação). A porcentagem de perda da dureza de superfície (%SH) foi calculada após cada desafio ácido. Os dados foram submetidos à análise de variância de medidas repetidas a dois critérios, seguida pelo teste de Tukey (p< 0,05). O processo de síntese levou a substituição de átomos de Na por átomos de Ca e as partículas apresentaram tamanhos homogêneos. As soluções contendo 0,25%, 0,5% e 1% CaNaTMP apresentaram menor %SH quando comparadas as suas contrapartes sem cálcio (p< 0,001), após os quatro desafios erosivos. Quando comparado a solução contendo 1100 ppm F, as soluções 0,5% e 1% CaNaTMP promoveram redução na perda de dureza (p< 0,001). Concluiu-se que soluções contendo CaNaTMP promoveram efeitos protetores superiores em comparação ao grupo 1100 ppm F sobre lesões iniciais do esmalte(AU)

The objective of the present study was to synthesize and characterize sodium cyclotriphosphate (NaTMP) containing calcium and verify its effect using an initial enamel erosion model. Cyclotriphosphate containing calcium (CaNaTMP) was synthesized using column chromatography, and addition of a solution with calcio hydroxide supernatant and analyzed by scanning electron microscopy and energydispersive X-ray spectroscopy. To determine the effect on enamel initial erosion, sound bovine enamel blocks (n=96) were selected by initial surface hardness and divided into to 8 experimental groups (12 blocks/group): control (deionized water), 0.24% NaF (1100 ppm F), 0.25%, 0.5% and 1% NaTMP and CaNaTMP at the same concentrations. The enamel blocks were immersed in 4 mL of the experimental solutions for 2 minutes followed by 4 erosive challenges (citric acid, 0.75%, pH 3.5, for 1 minute, under stirring). The percentage of surface hardness variation (%SH) was calculated after each acid challenge. Data were subjected to two-way repeated measures analysis of variance, followed by Tukey's test (p< 0.05). The synthesis process led to the replacement atoms of Na by atoms of Ca with particles having, homogeneous sizes. The solutions containing 0.25%, 0.5% and 1% CaNaTMP promoted lower %SH when compared to their counterparts without calcium (p< 0.001), after the four erosive challenges. When compared to the solution containing 1100 ppm F, the 0.5% and 1% CaNaTMP solutions were superior in reducing hardness loss (p< 0.001). It was concluded that solutions containing CaNaTMP led to superior protective effects compared to the 1100 ppm F group on initial enamel erosion(AU)

Avaliação da atividade antimicrobiana de biomateriais nanocompósitos de poliamida 6 com nanopartículas de trimetafosfato decoradas com nanopartícula de prata / Evaluation of the antimicrobial activity of polyamide 6 nanocomposite biomaterials with trimetaphosphate nanoparticles decorated with silver nanoparticles

O uso de novos materiais nanocompósitos para fabricação de dispositivos protéticos, matrizes para preenchimento de defeitos ósseos, proteção do tecido pulpar de dentes e túbulos dentinários expostos pode colaborar significativamente na qualidade de vida da população. Objetivo: Realizar o processamento da matriz polimérica de poliamida-6 (P6) impregnada com nanopartículas de trimetafosfato (TMP) e nanopartícula de prata (AgNP), avaliar a atividade antimicrobiana contra Streptococcus mutans e Candida albicans e a liberação de TMP e Ag+ . Métodos: Foi determinado a concentração inibitória mínima (CIM) da AgNP com ou sem a presença da NH3 para S. mutans e C. albicans. Em seguida, realizado a síntese e caracterização dos nanocompósios (P6, P6-2,5, 5 e 10%TMP associado ou não a AgNP), quantificação das unidades formadoras de colônia (UFC), determinação do halo de inibição e quantificação de TMP e Ag+ liberados durante 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 14, 16, 18, 20 e 24 horas em água deionizada. Os dados foram submetidos à análise de variância bidirecional, seguida do teste de Fisher LSD (p< 0,05). Resultados: A CIM para C. albicans foi de 9,40 mg/mL com ou sem a presença da NH3 e para o S. mutans foi de 601,9 mg/mL com NH3 e 300,9 mg/mL sem NH3. Nos testes de caracterização foi possível incorporar a P6 com TMP sem alterar suas propriedades. A maior quantidade de Ag+ liberada ocorreu nas primeiras três hora para todos os grupos decorados com AgNP. Houve liberação de TMP nas primeira três horas para os grupos P6-5%TMP e P6-10%TMP e para as demais membranas não foram detectadas liberações. No ensaio de difusão em ágar os halos formados para C. albicans e S. mutans mostraram ação da AgNP para ambos os microrganismos. Os grupos P6-Ag2,5%TMP e P6-Ag-5%TMP com AgNP apresentam maior redução de UFC para S. mutans quando comparado aos demais grupos, com maior redução no tempo de 18 horas. Para C. albicans todos os grupos apresentaram redução na UFC quando comparado ao controle, sem diferença estatística entre os mesmo. Conclusão: Foi possível desenvolver um matriz polimérica de P6 impregnada com TMP e AgNP com ação antimicrobiana contra os microrganismos testados(AU)

The use of new nanocomposite materials for the manufacture of prosthetic devices, matrices for filling bone defects, protection of the pulp tissue of exposed teeth and dentinal tubules can significantly contribute to the quality of life of the population. Objective: To perform the processing of the polymeric matrix of polyamide. 6 (P6) impregnated with trimetaphosphate nanoparticles (TMP) and silver nanoparticles (AgNP), evaluate the antimicrobial activity against Streptococcus mutans and Candida albicans and the release of TMP and Ag +. Methods: The minimum inhibitory concentration (MIC) of AgNP was determined with or without the presence of NH3 for S. mutans and C. albicans. Then, the synthesis and characterization of the nanocomposites (P6, P6-2.5, 5 and 10% TMP associated or not with AgNP), quantification of colony forming units (CFU), determination of the inhibition halo and quantification of TMP and Ag + released during 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 14, 16, 18, 20 and 24 hours in deionized water. The data were submitted to bidirectional analysis of variance, followed by the Fisher LSD test (p < 0.05). Results: The MIC for C. albicans was 9.40 mg / mL with or without the presence of NH3 and for S. mutans it was 601.9 mg / mL with NH3 and 300.9 mg / mL without NH3. In the characterization tests it was possible to incorporate the P6 with TMP without changing its properties. The highest amount of Ag + released occurred in the first three hours for all groups decorated with AgNP. There was TMP release in the first three hours for the P6-5% TMP and P6-10% TMP groups and for the other membranes, no releases were detected. In the agar diffusion assay, halos formed for C. albicans and S. mutans showed AgNP action for both microorganisms. The P6-Ag-2.5% TMP and P6-Ag-5% TMP groups with AgNP show a greater reduction in CFU for S. mutans when compared to the other groups, with a greater reduction in the time of 18 hours. For C. albicans, all groups showed a reduction in CFU when compared to the control, with no statistical difference between them. Conclusion: It was possible to develop a polymeric matrix of P6 impregnated with TMP and AgNP with antimicrobial action against the microorganisms tested(AU)

Antagonic and plant growth-promoting effects of bacteria isolated from mine tailings at El Fraile, Mexico / Efecto antagónico y promotor del crecimiento vegetal de bacterias aisladas de losjales mineros de El Fraile, México

Abstract Mine tailings contain high concentrations of heavy metals such as As, Pb, Cu, Mn, andFe, which are detrimental to the health of humans and the environment. In tailings at the ElFraile mine in Guerrero, Mexico, some plant species are apparently tolerant of heavy metals andcan be found growing in the tailings. These plants could be associating with heavy metal-tolerantbacteria that promote plant growth and improve biomass production, and these bacteria couldbe a useful alternative for bacteria-assisted phytoremediation. The objective of this study wasto isolate bacteria detected in the mine tailings at El Fraile-Taxco, focusing on those in the soilfrom the rhizosphere, the inner tissue of the root, leachate, and water, which have the poten-tial to promote plant growth. The ability of the isolated bacteria to promote plant growth wasevaluated in vitro. Of the 151 morphotypes isolated, 51% fix nitrogen, 12% dissolve phosphates,and 12%, 39.7%, and 48.3% produce indole acetic acid, gibberellins, and siderophores, respec-tively. In addition, 66.7% were observed to produce lytic enzymes, such as proteases, celluloses,lipases, esterases, and amylases, which exhibited activity against Fusarium, Aspergillus, andColletotrichum. The use of 16S rRNA analysis led to the identification of the bacterial generaChryseobacterium, Bacillus, Pseudomonas, Mycobacterium, Staphylococcus, Curtobacterium,Enterobacter, Agrobacterium, Ochrobactrum, Serratia, Stenotrophomonas, and Acinetobac-ter. The bacteria isolated from the rhizosphere exhibited the greatest ability to fix nitrogenand produced indole acetic acid, gibberellins, siderophore, and lytic enzymes. In addition, theisolates collected from the soil samples demonstrated ability to solubilize phosphate.

Resumen Los jales mineros contienen una alta concentración de metales pesados como As, Pb, Cu, Mn y Fe. Estas altas concentraciones de metales son perjudiciales para la salud humana y el medio ambiente. En los jales mineros de El Fraile, México, es posible detectar especies de plantas tolerantes a los metales pesados; estas plantas podrían estar asociadas con bacterias capaces de promover su crecimiento, además de poseer actividad antagonista contra hongos. El objetivo de este estudio fue aislar de diferentes microambientes (suelo rizosférico, tejido de raíz, lixiviado y agua) del área del jale El Fraile bacterias con potencial de promover el crecimiento vegetal y actividad antagonista contra hongos fitopatógenos. Estudios in vitro demostraron que el 51% de los morfotipos aislados (151 en total) fijan nitrógeno y el 12% disuelven fosfatos. Asimismo, el 12, 39,7 y 48,3% producen ácido indolacético, giberelinas y sideróforos, respectivamente. Por otro lado, se observó que el 66,7% producía enzimas líticas como proteasas, celulasas, lipasas, esterasas y amilasas, además de exhibir actividad antagonista contra Fusarium, Aspergillus y Colletotrichum. Mediante análisis del gen 16S ARNr, se identificó a estas bacterias como pertenecientes a los géneros Chryseobacterium, Bacillus, Pseudomonas, Mycobacterium, Staphylococcus, Curtobacterium, Enterobacter, Agrobacterium, Ochrobac-trum, Serratia, Stenotrophomonas y Acinetobacter. Las bacterias de la rizosfera exhibieron la mayor capacidad para fijar nitrógeno y produjeron ácido indolacético, giberelinas, sideróforos y enzimas líticas. Además, se detectó que las cepas aisladas de suelo rizosférico eran las que tenían la capacidad de solubilizar fosfatos.

Antagonic and plant growth-promoting effects of bacteria isolated from mine tailings at El Fraile, Mexico.

Mine tailings contain high concentrations of heavy metals such as As, Pb, Cu, Mn, and Fe, which are detrimental to the health of humans and the environment. In tailings at the El Fraile mine in Guerrero, Mexico, some plant species are apparently tolerant of heavy metals and can be found growing in the tailings. These plants could be associating with heavy metal-tolerant bacteria that promote plant growth and improve biomass production, and these bacteria could be a useful alternative for bacteria-assisted phytoremediation. The objective of this study was to isolate bacteria detected in the mine tailings at El Fraile-Taxco, focusing on those in the soil from the rhizosphere, the inner tissue of the root, leachate, and water, which have the potential to promote plant growth. The ability of the isolated bacteria to promote plant growth was evaluated in vitro. Of the 151 morphotypes isolated, 51% fix nitrogen, 12% dissolve phosphates, and 12%, 39.7%, and 48.3% produce indole acetic acid, gibberellins, and siderophores, respectively. In addition, 66.7% were observed to produce lytic enzymes, such as proteases, celluloses, lipases, esterases, and amylases, which exhibited activity against Fusarium, Aspergillus, and Colletotrichum. The use of 16S rRNA analysis led to the identification of the bacterial genera Chryseobacterium, Bacillus, Pseudomonas, Mycobacterium, Staphylococcus, Curtobacterium, Enterobacter, Agrobacterium, Ochrobactrum, Serratia, Stenotrophomonas, and Acinetobacter. The bacteria isolated from the rhizosphere exhibited the greatest ability to fix nitrogen and produced indole acetic acid, gibberellins, siderophore, and lytic enzymes. In addition, the isolates collected from the soil samples demonstrated ability to solubilize phosphate.

Efeito de vernizes fluoretados suplementados com nanopartículas de trimetafosfato de sódio sobre o desgaste dental erosivo in vitro e in situ / Effect of fluoride varnishes supplemented with nanosized Sodium Trimetaphosphate on enamel erosive wear in vitro and in situ

O presente estudo avaliou o efeito de vernizes fluoretados suplementados com nanopartículas de Trimetafosfato de Sódio (TMP) sobre o desgaste erosivo do esmalte dental bovino, em protocolos in vitro e in situ. Para a 1ª fase, blocos de esmalte dental bovino (n=100) foram selecionados por meio de dureza de superfície (DS) e aleatoriamente divididos em 5 grupos experimentais (n=20/grupo), de acordo com os vernizes testados: (a) Placebo (Pla - sem F ou TMP), (b) 5% NaF, (c) 5% NaF + 5% TMP microparticulado (5% Micro), (d) 5% NaF + 2,5% TMP nanoparticulado (2,5% Nano), (e) 5% NaF + 5% TMP nanoparticulado (5% Nano). Os blocos receberam uma única aplicação dos vernizes e foram imersos em saliva artificial por 6 h. Em seguida, os vernizes foram removidos e todos os blocos, submetidos a 4 desafios erosivos diários durante 5 dias (ERO, imersão em ácido cítrico 0,05 M, pH 3,2, 90 s/ciclo, sob agitação). Após ERO, metade dos blocos foi submetida a abrasão por escovação (15 s/ciclo) com dentifrício placebo (ERO+ABR). Os blocos foram analisados por perfilometria, dureza de superfície (DS) e dureza em secção longitudinal (ΔKHN). Os dados foram submetidos a ANOVA a dois critérios e Teste de Fisher LSD (p< 0,05). O desgaste do esmalte foi significativamente menor para ERO comparado a ERO+ABR para todos os vernizes testados (p< 0,001), seguindo o padrão 5% Nano < 5% Micro < 5% NaF < 2,5% Nano < Pla (ERO e ERO+ABR). A maior perda de DS foi observada para o Pla e a menor para 5% NaF (ERO) e 2,5% Nano (ERO+ABR), sem diferenças significativas entre 2,5% Nano, 5% NaF e 5% Micro. Os maiores valores de ΔKHN foram observados para 5% Micro e 5% Nano a 5-30 µm, com diferenças menos acentuadas entre os grupos a 30-70 µm (ERO e ERO+ABR). Para a 2ª fase, blocos de esmalte bovino (n=224) foram selecionados por DS e distribuídos aleatoriamente entre os grupos: (a) Placebo (Pla - sem F ou TMP), (b) 5% NaF, (c) 5% NaF + 5% TMP microparticulado (5% Micro), e (d) 5% NaF + 5% TMP nanoparticulado (5% Nano). Os blocos foram inseridos em dispositivos acrílicos palatinos (n=4/dispositivo), e tratados com os vernizes uma única vez, permanecendo na cavidade bucal dos voluntários (n=14) por 6 h. Em seguida, os vernizes foram removidos e os blocos, submetidos à ERO (imersão ex vivo em ácido cítrico 0,05 M, pH 3,2, 90 s, 4x/dia), enquanto dois blocos foram adicionalmente submetidos a abrasão por escovação com dentifrício fluoretado (ERO+ABR), totalizando 5 dias em cada etapa experimental, seguindo um protocolo duplo-cego e cruzado. As análises dos blocos e dos dados foram idênticas às da 1ª fase. Os valores do desgaste seguiram um padrão similar em ambas as condições experimentais (ERO ou ERO+ABR), com 5% Nano < 5% Micro < 5% NaF < Pla. Um padrão similar foi observado para dureza em secção longitudinal (ΔKHN), apesar de não serem verificadas diferenças significativas entre 5% Micro×5% Nano (5-30 µm). Quanto à perda de DS, o maior valor foi observado para Pla e o menor para 5% Nano (ERO ou ERO+ABR), sem diferenças significativas entre Pla×5% NaF (ERO), 5% NaF×5% Micro (ERO+ABR), e 5% Micro×5% Nano (ERO+ABR). Diante dos resultados, conclui-se que a adição de TMP a vernizes fluoretados melhorou significativamente a proteção contra o desgaste erosivo do esmalte in vitro e in situ. O uso de 5% de TMP em escala nanométrica aumentou ainda mais esses efeitos(AU)

The present study evaluated the effect of fluoride (F) varnishes supplemented with sodium trimetaphosphate (TMP) nanoparticles on erosive tooth wear, using in vitro and in situ protocols. For the first phase, bovine enamel blocks (n=100) were selected by surface hardness (SH) and randomly divided into 5 experimental groups (n=20/group), according to the varnishes tested: (a) Placebo (Pla - without F or TMP), (b) 5% NaF, (c) 5% NaF + 5% micrometric TMP (5% Micro), (d) 5% NaF + 2.5% nano-sized TMP (2.5% Nano), (e) 5% NaF + 5% nano-sized TMP (5% Nano). Blocks received a single varnish application, and were immersed in artificial saliva for 6 h. Varnishes were then removed and all blocks, subjected to 4 daily erosive challenges during for 5 days (ERO, immersion in 0.05 M citric acid, pH 3.2, 90 s/cycle, under agitation). After ERO, half of the blocks were subjected to abrasion by brushing (15 s/cycle) with placebo dentifrice (ERO+ABR). Blocks were analyzed by profilometry, surface hardness (SH) and cross-sectional hardness (ΔKHN). The data were submitted to 2-way ANOVA and Fisher's LSD test (p< 0.05). Enamel wear was significantly lower for ERO compared to ERO+ABR for all varnishes tested (p< 0.001), following the pattern 5% Nano < 5% Micro < 5% NaF < 2.5% Nano < Pla (ERO and ERO+ABR). The highest SH loss was observed for Pla, and the lowest for 5% NaF (ERO) and 2.5% Nano (ERO+ABR), without significant differences between 2.5% Nano, 5% NaF and 5% Micro. The highest values of ΔKHN were observed for 5% Micro and 5% Nano at 5-30 µm, with less marked differences between the groups at 30-70 µm (ERO and ERO+ABR). In the second phase, bovine enamel blocks (n=224) were selected by SH and randomly distributed among the groups: (a) Placebo (Pla - without F or TMP), (b) 5% NaF, (c) 5% NaF + 5% micrometric TMP (5% Micro), and (d) 5% NaF + 5% nano-sized TMP (5% Nano). The blocks were inserted in acrylic palatal devices (n=4/device), and treated with the varnishes only once, remaining in the oral cavity of the volunteers (n=14) for 6 h. Then, the varnishes were removed and the blocks, subjected to ERO (ex vivo immersion in 0.05 M citric acid, pH 3.2, 90 s, 4x/ day), while two blocks were additionally subjected to abrasion by brushing with fluoride dentifrice (ERO+ABR), totaling 5 days in each experimental stage, following a double-blind, crossover protocol. The blocks and the data were analyzed as described for the first phase. The wear values followed a similar pattern under both experimental conditions (ERO or ERO+ABR), with 5% Nano < 5% Micro < 5% NaF < Pla. A similar pattern was observed for hardness in depth (ΔKHN), although no significant differences were found between 5% Micro×5% Nano (5-30 µm). As for SH loss, the highest value was observed for Pla, and the lowest for 5% Nano (ERO or ERO+ABR), without significant differences between Pla×5% NaF (ERO), 5% NaF×5% Micro (ERO+ABR), and 5% Micro×5% Nano (ERO + ABR). In view of the results, it was concluded that the addition of TMP to fluoride varnishes significantly improved protection against erosive enamel wear in vitro and in situ. The use of 5% nano-sized TMP further increased these effects(AU)

Efeito de dentifrícios com reduzida concentração de fluoreto contendo trimetafosfato de sódio e polióis na erosão inicial do esmalte / Effect of low-fluoride toothpaste containing sodium trimetaphosphate and polyols on initial enamel erosion

Este estudo in vitro avaliou o efeito de dentifrícios contendo fluoreto (F), trimetafosfato de sódio (TMP) e/ou xilitol e eritritol (XE) em inibir ou reparar lesão erosiva inicial do esmalte. Blocos de esmalte bovino (n=120) foram selecionados por dureza de superfície (SH) inicial e divididos em 5 grupos compostos por dentifrícios (24 blocos/grupo): Placebo (sem F, TMP e XE); 1100 ppm F; 16% xilitol + 4% eritritol (XE); 200 ppm F + 0,2% TMP (200 ppm F/TMP); e 200 ppm F + 0,2% TMP + 16% xilitol + 4% eritritol (200 ppm F/TMP/XE). Para a análise do efeito protetor, blocos hígidos (n=60) foram imersos 1x/2 minutos em suspensão de dentifrícios/saliva humana. Em seguida, os blocos foram submetidos a 4 desafios erosivos com ácido cítrico (0,75%, pH 3,5) de 1 minuto cada, sob agitação. A seguir, a SH foi determinada pós-tratamento (t) e após o 1º, 2º, 3º e 4º desafios ácidos erosivos (d) para o cálculo da porcentagem de variação da SH (%SH). Para a análise do efeito reparador, esmalte previamente erodido (n=60) foi tratado e submetido aos mesmos desafios erosivos descritos anteriormente. A %SH de recuperação (R) e %SHt foram calculadas, bem como, a diferença entre a %SHR e %SHd obtendo-se o Δ%SH para cada desafio. Experimento adicional foi realizado para análise da deposição de precipitados por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) em esmalte hígido e erodido. Os dados foram submetidos à análise de variância de medidas repetidas a dois critérios, seguida pelo teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Os resultados mostraram que o maior efeito protetor e reparador foi produzido pelo dentifrício 200 ppm F/TMP/XE quando comparado aos demais grupos (p<0,001). Os grupos 1100 ppm F e 200 ppm F/TMP apresentaram similar efeito protetor para o 1º, 2º e 3º desafios (p>0,05), e menor quando comparados ao XE (p<0,001). O efeito protetor e reparador foi: XE>200 ppm F/TMP>1100 ppm F>Placebo (p<0,001). Na MEV observou-se deposição de precipitado no esmalte para todos os grupos, formando uma camada mais espessa e homogênea nos grupos contendo XE e/ou TMP. Concluiu-se que dentifrício contendo 200 ppm F, TMP e polióis apresenta efeito protetor e reparador superior quando comparado a um dentifrício 1100 ppm F em lesões erosivas iniciais no esmalte(AU)

This in vitro study evaluated the effect of toothpaste containing fluoride (F), sodium trimetaphosphate (TMP) and/or xylitol and erythritol (XE) in inhibit or repair initial enamel erosion lesions. Bovine enamel blocks (n=120) were selected by initial surface hardness (SH) and divided into 5 groups of toothpastes (n=24 blocks/group): Placebo (no F, TMP or XE); 1100 ppm F; 16% xylitol + 4% erythritol (XE); 200 ppm F + 0.2% TMP (200 ppm F/TMP); and 200 ppm F + 0.2% TMP + 16% xylitol + 4% erythritol (200 ppm F/TMP/XE). For the analysis of the protective effect, sound blocks (n=60) were immersed in toothpaste slurry in human saliva once for 2 minutes. Hereafter, the blocks were submitted to 4 erosive challenges in citric acid (0.75%, pH 3.5) by 1 minute, under stirring. Then, the SH was determined after treatment (t) and after the 1st, 2nd, 3rd and 4th erosive acid challenges (d) to calculate the percentage of change of the SH (%SH). For the analysis of the repair effect, eroded enamel (n=60) were treated and submitted to erosive challenges as describe previously. The recovery (R) of %SH and %SHt were calculated, as well as the difference between the %SHR and %SHd obtaining the Δ%SH for each challenge. Additional experimental was performed to analysis the deposition of precipitates by Scanning Electronic Microscopy (SEM) on sound and eroded enamel. Variables were submitted to two-way repeated measures analysis of variance followed by StudentNewman-Keuls test (p<0.05). The results showed that the highest protective and repair effect was produced by the 200 ppm F/TMP/XE toothpaste when compared to the other groups (p<0.001). The 1100 ppm F and 200 ppm F/TMP groups had similar protective effect for the 1st, 2nd and 3rd challenges (p>0.05), and lower when compared to XE (p<0.001). The protective and repair effect was: XE>200 ppm F/TMP>1100 ppm F>Placebo (p<0.001). There were deposition of precipitates on enamel for all groups, with a thicker layer and homogeneous for XE and/or TMP groups. It was concluded that toothpaste containing 200 ppm F, TMP and polyols has superior protective and repair effect when compared to 1100 ppm F toothpaste in initial enamel erosive lesions(AU)

Laguncularia racemosa (Combretaceae) y bacterias terrestres asociadas medio siglo después de la contaminación crónica por hidrocarburos

La evaluación del impacto del petróleo en la interacción suelo-raíz de la planta de mangle blanco, Laguncularia racemosa, es básica para identificar los cambios en la actividad microbiana y en el potencial biotecnológico para la remediación de histosoles contaminados. El objetivo de la investigación fue evaluar la distribución espacial de los hidrocarburos totales del petróleo (HTP) en el suelo orgánico, la densidad poblacional de bacterias promotoras del crecimiento vegetal, así como la respiración microbiana en el rizoplano (RI) en la rizósfera (RZ) y en suelo no rizosférico (SNR) de L. racemosa. Una superficie de 8 000 m2 de un histosol afectado desde 1967 y 1968 se evaluó por derrame crónico de petróleo y lodos de perforación provenientes del pozo petrolero La Venta 248. Se seleccionaron 15 árboles de L. racemosa y se extrajeron muestras del RI, RZ y SNR. Los HTP se extrajeron en equipo soxhlet con diclorometano durante ocho horas y se cuantificaron por gravimetría. La cantidad promedio extraída de HTP permitió la diferenciación de cuatro suelos (S) en el área evaluada, con valor promedio para el S1 de 1 797 mg kg-1 (no contaminado para la normativa mexicana) y tres suelos contaminados: S2 con 3 294, S3: 5 249 y S4: 10 389 mg kg-1. Los resultados evidencian diferencias estadísticas (Duncan, P ≤ 0.05) entre medias de las variables evaluadas. La mayor acumulación de HTP fue 22 962 mg kg-1, se extrajo del SNR en el S4. Las mayores densidades de bacterias fijadoras de N, solubilizadoras de P, Azospirillum y Azotobacter fueron bioestimuladas por la presencia de niveles altos de HTP en el suelo, sin embargo la respiración microbiana fue inhibida. Los resultados sugieren que L. racemosa es sostenible en suelos con petróleo intemperizado, y es un bioestimulador de la actividad microbiana para la atenuación natural.

The evaluation of the impact of oil on the soil-root interaction of the white mangrove plant, Laguncularia racemosa is essential to identify changes in microbial activity and biotechnological potential for remediation contaminated histosols. The objective was to evaluate the spatial distribution of total petroleum hydrocarbons (THP) in organic soil, the population density of plant growth promoting bacteria, also in microbial respiration in the rhizoplane (RI), in the rhizosphere (RZ) and in non-rhizospheric soil (NRS) of L. racemosa. An area of 8 000 m2 of an affected histosol was evaluated, during 1967 and 1968, by chronic oil spill and drilling mud from the La Venta 248 oil well. Fifteen trees of this species were selected to obtain samples of the RI, RZ and NRS. The TPH were extracted in soxhlet with dichloromethane for eight hours and quantified by gravimetry. The average amount extracted from TPH allowed the differentiation of four soils (S) from the evaluated area, the average values were for S1: 1 797 mg kg-1 (not contaminated for Mexican regulations) and three contaminated soils, the values are S2: 3 294, S3: 5 249, and S4: 10 389 mg kg-1. The results show statistical differences (Duncan, P ≤ 0.05) between means of the evaluated variables. The greatest accumulation of TPH was 22 962 mg kg-1, it was extracted from the NRS in S4. The highest densities of N-fixing bacteria, P solubilizers, Azospirillum and Azotobacter were biostimulated by the presence of high levels of THP in the soil, however microbial respiration was inhibited. The results suggest that L. racemosa is sustainable in soils with weathering oil, and is a biostimulator of microbial activity for natural attenuation.

Efeitos da obesidade induzida por dieta hipercalórica e de seu tratamento com exenatida sobre a neurotransmissão colinérgica muscarínica em hipocampo de ratos / Effects of obesity induced by hypercaloric diet and its treatment with exenatide on the muscarinic cholinergic neurotransmitter in rat hippocampus

Introduction: Molecular cloning studies have revealed the existence of five distinct muscarinic acethylcholine receptor (mAChRs) subtypes (M1 to M5), which interact, via a G protein-regulated process, with multiple effector systems. The M1, M3 and M5 subtypes couple primarily to PLC-mediated phosphoinositide hydrolysis, while the M2 and M4 subtypes couple primarily to adenylyl cyclase inhibition. In the Hippocampus, the modulation of excitatory transmission by mAChRs seems particularly relevant to learning and memory processing in the hippocampal formation, where the diversity and differential localization of the receptors are likely to account for the complex cholinergic modulation in this structure. Experimental studies has been shown that obesity-associated with hypercaloric diet impair learning and memory in rodents, suggesting a strong association between obesity and cognitive dysfunction. However, the mechanisms of how the obesity induced by hypercaloric diet affect memory are not understood fully. Objective: The aim of this study was to investigate the possible effects of obesity induced by hypercaloric diet and its treatment with exenatide, an antidiabetogenic and potential antiobesogenic drug derived from the venom of the Gila monster Heloderma suspectum, on the affinity, density, subtypes and intracellular signaling pathways linked to activation of mAChRs in rat hippocampus. Methodology: Male Wistar rats were divided into three groups: control (CT), obese induced by hypercaloric diet (DIO) and DIO treated with exenatide (DIO+E). The experimental procedures were approved by the Research Ethics Committee of the Butantan Institute (# 22381003/17). In the hippocampus obtained from CT, DIO and DIO+E were performed: I- [ 3H]QNB binding to determine the affinity (KD) and density (Bmax) of mAChRs; II- Expression of each mAChR subtype (M1 to M5) by immunoprecipitation assays and III- Determination of [3H]inositol phosphates accumulation. Results: Specific binding analysis showed that the affinity did not differ among CT, DIO and DIO+E. In contrast, the density of mAChRs obtained in DIO animals was lower than that obtained from CT rats. Moreover, the density of mAChRs from DIO+E was similar when compared with CT rats. Immunoprecipitation assays induced a decrease in the expression of M1 and M3 subtypes of DIO animals when compared with CT. Treatment with exenatide (DIO+E) recovered the expression of the two subtypes similar to CT. On the other hand, the M2, M4 and M5 subtypes did not differ among CT, DIO and DIO+E. Carbacol caused a concentration-dependent increase in the accumulation of [3 H]inositol phosphates in the 3 experimental groups. However, the magnitude of the maximal response to carbachol was lower in the DIO group compared to CT and DIO+E animals, which did not differ from each other. Conclusion: Our results indicate that obesity induced by hypercaloric diet strongly influences the expression and intracellular signaling coupled to M1-M3 subtypes. The exenatide reversed these effects, suggesting an important role on hippocampal muscarinic cholinergic system. This action of obesity might be a key step mediating cellular events important for learning and memory.

Introdução: Estudos de clonagem molecular revelaram a existência de cinco diferentes subtipos de receptores muscarínicos de acetilcolina (mAChRs) (M1-M5) que interagem com múltiplos sistemas efetores através de um processo regulado pela proteína G. Os subtipos M1, M3 e M5 acoplam-se principalmente à hidrólise do fosfoinositídeos mediada pela fosfolipase C. Por outro lado, os subtipos M2 e M4 acoplam-se principalmente à inibição da adenililciclase. No hipocampo, a modulação da transmissão excitatória pelos mAChRs é relevante para o aprendizado e o processamento da memória aonde a diversidade e a localização diferencial dos mAChRs são responsáveis pela complexa modulação colinérgica nessa estrutura. Estudos experimentais demonstraram que a obesidade induzida por dieta hipercalórica prejudica o aprendizado e a memória em roedores, sugerindo uma associação entre obesidade e disfunção cognitiva. No entanto, os mecanismos pelos quais a obesidade afeta os processos cognitivos não são totalmente compreendidos. Objetivo: O objetivo deste estudo foi investigar os possíveis efeitos da obesidade induzida por dieta hipercalórica e seu tratamento com exenatida, uma droga anti- diabetogênica e anti-obesogênica, derivada do veneno do Monstro-de-Gila (Heloderma suspectum), sobre a afinidade, densidade, subtipos e sinalização intracelular acoplada à ativação de mAChRs no hipocampo de ratos. Metodologia: Ratos machos Wistar foram divididos em três grupos: controle (CT), obeso induzido por dieta hipercalórica (DIO) e DIO tratado com exenatida (DIO+E). Os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Instituto Butantan (no 22381003/17). No hipocampo obtido de animais CT, DIO e DIO+E foram realizados: I- Ensaios de saturação da ligação do [3H]QNB para determinar os parâmetros farmacológicos KD (afinidade) e Bmax (densidade); II- A expressão de cada subtipo de receptor muscarínico (M1 a M5) por ensaios de imunoprecipitação com anticorpo que reconhece cada um dos subtipos de mAChRs e III- Determinação do conteúdo intracelular de [3H]fosfatos de inositol. Resultados: A análise da ligação específica mostrou que a afinidade não diferiu entre os grupos CT, DIO e DIO-E. Contrariamente, a densidade de mAChRs obtida nos animais DIO foi menor que a observada em ratos CT. A densidade dos animais DIO+E foi similar ao CT. Animais DIO induziram uma diminuição na expressão dos subtipos M1 e M3 quando comparada com o CT. O tratamento com exenatida (DIO+E) recuperou a expressão dos dois subtipos similar ao CT. Por outro lado, os subtipos M2, M4 e M5 não diferiram entre os grupos CT, DIO e DIO+E. O carbacol causou um aumento, dependente da concentração, sobre o acumulo de [3H]fosfatos de inositol nos 3 grupos experimentais. Entretanto, a magnitude da resposta máxima ao carbacol foi menor no grupo DIO comparativamente aos animais CT e DIO+E que não diferiram entre si. Conclusão: Nossos resultados indicam que a obesidade induzida por dieta hipercalórica, influência de maneira contundente, por meio da diminuição da expressão e sinalização intracelular acoplada aos subtipos M1 e M3. A exenatida reverteu esses efeitos, sugerindo ter um papel importante na neurotransmissão colinérgica muscarínica hipocampal. O presente estudo é também o primeiro passo para outras abordagens como a avaliação da importância funcional dessa modulação sobre os mAChRs no hipocampo.

Efeito de dentifrício fluoretado contendo hexametafosfato de sódio na erosão inicial do esmalte / Effect of fluoride toothpaste containing sodium hexametaphosphate on initial enamel erosion

Este estudo in vitro avaliou o efeito de dentifrício fluoretado (F) contendo ou não hexametafosfato de sódio (HMP) em inibir ou reparar a erosão inicial do esmalte. Blocos de esmalte bovino hígido (n=48) e desmineralizado (n=48) foram selecionados por dureza superficial inicial e submetidos a 4 grupos experimentais (12 blocos/grupo): Placebo (sem F e HMP), 1100 ppm F, 1% HMP e 1100 ppm F + 1% HMP. Para a análise do efeito protetor, os blocos de esmalte hígido foram imersos uma única vez em solução de dentifrícios com saliva humana por 2 minutos. Em seguida, os blocos foram submetidos a 4 desafios erosivos com ácido cítrico (0,75%, pH 3,5) por 1 minuto, sob agitação. A percentagem de variação da dureza superficial (%SH) foi calculada após os tratamentos e pós desafios ácidos de 1, 2, 3 e 4 minutos. Para a análise do efeito reparador, o esmalte desmineralizado foi tratado e submetido aos mesmos desafios erosivos, como descritos anteriormente. A partir de então, %SH foi calculada após a desmineralização, tratamentos e desafios ácidos de 1, 2, 3 e 4 minutos. Experimento adicional foi realizado para análise da deposição de precipitados por microscopia eletrônica de varredura (MEV) em esmalte desmineralizado. Os dados foram submetidos à análise de variância de medidas repetidas a dois critérios, seguida pelo teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Os resultados mostraram que o grupo placebo apresentou a menor capacidade de inibir e reparar a erosão do esmalte (p<0,001). A perda de dureza aumentou durante repetidos desafios ácidos para todos os grupos; no entanto, o efeito contra a erosão do dentifrício com F/HMP mostrou-se mais resistente. Dentifrícios contendo 1100 ppm F + 1% HMP apresentou maior capacidade de inibir e reparar a erosão do esmalte seguido pelos grupos 1% HMP e 1100 ppm F (p<0,001). Na MEV observou-se deposição de precipitado no esmalte para todos os grupos, formando uma camada mais espessa e homogênea nos grupos com HMP. Concluiu-se que o dentifrício contendo 1100 ppm F e 1% HMP teve um efeito superior quando comparado ao 1100 ppm F em inibir a erosão inicial do esmalte, reparar o esmalte previamente erodido e resistir aos repetidos desafios erosivos(AU)

This in vitro study evaluated the effect of fluoride (F) toothpaste containing or not sodium hexametaphosphate (HMP) in inhibit or repair initial enamel erosion. Sound (n=48) and demineralized (n=48) bovine enamel blocks were selected by initial surface hardness and subjected to 4 experimental groups (12 blocks/group): Placebo (without F and HMP), 1100 ppm F, 1% HMP and 1100 ppm F + 1% HMP. For the analysis of the protective effect, sound enamel were immersed in toothpaste slurry in human saliva once for 2 minutes. Hereafter, enamel blocks were submitted to 4 erosive challenges in citric acid (0.75%, pH 3.5) by 1 minute, under stirring. Percentage of surface hardness change (%SH) was calculated after treatments and 1, 2, 3 and 4 minutes. For the analysis of the repair effect, demineralized enamel were treated and submitted to erosive challenges as describe previously. Hereafter, %SH was calculated after demineralization, treatments and 1, 2, 3 and 4 minutes. Additional experimental was performed to analysis the deposition of precipitates by scanning electronic microscopy (SEM) on demineralized enamel. Variables were submitted to two-way repeated measures analysis of variance followed by Student-Newman-Keuls test (p<0.05). The results showed that the Placebo group had the lowest capacity to inhibit and repair enamel erosion (p<0.001). Hardness loss increased during repeated acid challenges for all groups; however the effect against erosion of F/HMP toothpaste proved to be more resistant. Toothpaste containing 1100 ppm F and 1% HMP presented greatest ability to inhibit and repair enamel erosion followed by 1% HMP and 1100 ppm F groups (p<0.001). There were deposition of precipitated on enamel for all groups, forming a thicker layer and homogeneous HMP groups. It was conclude that toothpaste containing 1100 ppm F and 1% HMP had a superior effect when compared to 1100 ppm F to inhibit the initial erosion on sound enamel, repair the eroded enamel and to resist to the repeated erosive challenges(AU)

Capacidad solubilizadora de fosfato de aluminio por hongos rizosféricos aislados de un Andisol colombiano / Solubilizing capacity of aluminum phosphate by rhizospheric fungi isolated from an Andisol Colombian / Capacidade de solubilização de fosfato de alumínio por fungos rizosféricos isolados de um Andisol colombiano

RESUMEN A partir de un Typic Melanudands cultivado con café (Coffea arabica variedad Caturra), proveniente del Departamento del Cauca (Colombia), se aislaron hongos con capacidad solubilizadora de fosfato de aluminio (Al-P), de los cuales se seleccionaron dos microorganismos que presentaron la mayor actividad, identificados como cepa UNHI (Mycelia sterilia), y UNH2 (Penicillium sp). Los hongos seleccionados fueron evaluados por quince días en medio líquido Pikovskaya (PVK) con Al-P bajo dos condiciones, con agitación (método A) y en reposo con aireación (método B). Al comparar los resultados se encontraron diferencias estadísticas significativas en el porcentaje de fósforo soluble, el método A presentó mejores resultados con un porcentaje de 73,8% frente a 62% con la cepa UNH1 y en menor proporción con la cepa UNH2 49% y 44%. El incremento de biomasa fue mayor con el método B y el pH de los medios de cultivo no mostraron diferencias significativas, con un pH promedio de 2,7.

ABSTRACT Based on Typic Melanudands grow with coffea (Coffea Arabica Caturra variety) resulting from the Cauca department, fungi with solubilization capacity of aluminum phosphate were isolated (Al-P), from which two microorganisms with greater solubilization activity were selected, identified as strain UNH!: Mycelia sterilia y UNH2: Penicillium sp. Selected fungi were evaluated through the Pikovskaya liquid (PVK) with (Al-P), under two conditions, with stirring (A method) and repose with aireation ( B method), for fifteen days. When comparing the results, significant statistical differences were found in the percentage of soluble phosphorus, method A presented better results with a percentage of 73.8% compared to 62% with the strain UNH1 and in smaller proportion with the strain UNH2 49% and 44 %. The increase in biomass was greater with method B and the pH of the culture media did not show significant differences, with an average pH of 2.7.

RESUMO De PVAc Melanudands cultivadas com café (Coffea arabica variedade caturra), a partir do Departamento (Colômbia), fungos foram isoladas com fosfato de alumínio capacidade de solubilização (Al-P), de que introduziu foram seleccionados dois microrganismos a atividade mais alta, identificada como cepa UNH1 (Mycelia sterilia) e UNH2 (Penicillium sp). fungos seleccionados foram avaliadas durante duas semanas em meio líquido Pikovskaya (PVK) com Al-P sob duas condições, com agitação (método A) e que descansa com arejamento (método B). Ao comparar os resultados estatisticamente diferenças significativas na percentagem de fósforo solúvel encontrada, método A proporcionou melhores resultados com uma percentagem de 73,8% versus 62% com a estirpe UNH1 e em menor grau com a estirpe UNH2 49% e 44 %. O aumento da biomassa foi maior com o método B e o pH do meio de cultura não mostrou diferenças significativas, com um pH médio de 2,7.

Efeito do hexametafosfato de sódio, associado ou não ao fluoreto, no biofilme misto contendo Streptococcus mutans e Candida albicans / Effect of sodium hexametaphosphate, associated or not with fluoride, on mixed biofilm containing Streptococcus mutans e Candida albicans

O presente estudo teve como objetivo verificar o efeito do hexametafosfato de sódio (HMP), associado ou não ao fluoreto (F), sobre a composição orgânica, inorgânica e no pH do biofilme mistos de S. mutans e C. albicans formados in vitro. Para todos os estudos, os biofilmes foram formados em poços de placas de microtitulação, colocando uma suspensão (1x107 células/mL C. albicans + 1x108 células/mL S. mutans) em saliva artificial suplementada com sacarose (0,4%), a qual tinha metade de seu conteúdo renovada a cada 24 horas. Os biofilmes foram tratados três vezes (72, 78 e 96 horas de formação), por um minuto, com soluções contendo HMP (0.25, 0.5 ou 1%) com ou sem 500 ppm F, além de soluções contendo 500 e 1100 ppm F. A saliva artificial foi utilizada como controle negativo. Para o estudo microbiológico, após o terceiro tratamento foram realizados os testes de quantificação de células cultiváveis (CFU), biomassa total (teste colorimétrico de cristal violeta ­ CV), atividade metabólica (redução de XTT) e quantificação dos componentes da matriz extracelular (proteína, carboidrato e ácidos nucleicos). Todos os ensaios foram realizados em triplicata, em três ocasiões diferentes. Os resultados foram submetidos à análise de variância a um critério, seguida pelo teste Fisher LSD (p<0.05). O HMP apresentou efeito redutor principalmente na biomassa, metabolismo e nos componentes da matriz extracelular do biofilme. Biofilmes formados por 96 h formam expostos a três diferentes concentrações de sacarose (10, 20 ou 30%) durante 1, 3 ou 5 min. O pH foi medido antes da exposição à sacarose, imediatamente após sua remoção e após 1, 3, 5 e 10 min após a retirada da sacarose. Os resultados foram submetidos à análise de variância a três critérios, seguida pelo teste Fisher LSD (p<0.05). O biofilme exposto a solução de sacarose a 20% por 3 min exibiu padrão de alteração de pH semelhante ao observado in vivo. Para o estudo da concentração de F, Ca, e Pi, após o período de tratamento, estes foram analisados no biofilme total e no fluido do biofilme após a mensuração do pH do biofilme. Em outro conjunto de experimentos, após o terceiro tratamento (96 h de formação de biofilme) o biofilme foi exposto, por 3 minutos, à solução de sacarose a 20%. Esta foi removida e, após 1 minuto, analisou-se o pH do meio e as concentrações de F, Ca, e Pi tanto na biomassa como no fluido do biofilme. Os dados foram submetidos à análise de variância a dois critérios, seguida pelo teste de Fisher LSD (p<0.05). O tratamento com HMP aumentou a concentração de F e Pi no fluido do biofilme antes da exposição à sacarose, além de manter o pH do meio mais próximo do neutro, mesmo após a exposição do biofilme à sacarose. Assim, é possível concluir que o HMP interfere na biomassa, metabolismo, composição orgânica e inorgânica, bem como no pH do biofilme testado(AU)

The aim of the present study was to verify the effect of sodium hexametaphosphate (HMP), associated or not to fluoride (F), on the inorganic, organic composition and pH of the mixed biofilm of S. mutans and C. albicans, formed in vitro. For all studies, the biofilms were formed in wells of microtiter plates by placing a suspension (1 x 107 cells/mL C. albicans + 1x108 cells/mL S. mutans) in artificial saliva supplemented with sucrose (0,4%), which had half of its content renewed every 24 hours. Biofilms were treated three times (72, 78 and 96 hours of formation), for one minute, with solutions containing HMP (0.25, 0.5 or 1%) with or without 500 ppm F, as well as solutions containing 500 and 1100 ppm F. Artificial saliva was used as a negative control. For the microbiological study, the following tests were performed: quantification of cultivable cells (UFC), total biomass (colorimetric crystal violet test - CV), metabolic activity (XTT reduction) and quantification of matrix components (protein, carbohydrate and nucleic acid). All assays were performed in triplicate on three different occasions. The results were submitted to one-way analysis of variance, followed by the Fisher LSD's test (p<0.05). HMP showed a reducing effect mainly on the biomass, metabolism and components of the extracellular matrix of the biofilm. Biofilms formed for 96 h were exposed to three different concentrations of sucrose (10, 20 or 30%) for 1, 3 or 5 min. The pH was measured before exposure to sucrose, immediately after its removal and after 1, 3, 5 and 10 min after removal of the sucrose. The results were submitted to 3- way analysis of variance, followed by the Fisher LSD test (p<0.05). The biofilm exposed to 20% sucrose solution for 3 min exhibited a pattern of pH change similar to that observed in vivo. For the study of the concentrations of F, Ca, and Pi, these ions were analyzed in the total biofilm and in the biofilm fluid after treatment with the test solutions and after the pH measurement of the biofilm. In another set of experiments, after the third treatment (96 h of biofilm formation), the biofilms were exposed for 3 minutes to a 20% sucrose solution. This was removed and after 1 minute the biofilms were collected, and the pH of the medium and F, Ca, and Pi concentrations were determined both in the biomass and in the biofilm fluid. The data were submitted to two-way analysis of variance, followed by Fisher LSD's test (p<0.05). Treatment with HMP increased F and Pi concentration of the biofilm fluid prior sucrose exposition, and maintained the pH of the medium close to neutral values even after exposure of the biofilm to sucrose. Thus, it is possible to conclude that HMP interferes in the biomass, metabolism, organic and inorganic composition and the pH of the biofilm tested(AU)

Avaliação de duas formas de hidroxiapatita e beta-tricálcio fosfato em enxertos sinusais com concomitante instalação de implantes em coelhos / Evaluation of two formulations of hydroxyapatite and beta-tricalcium phosphate in rabbit sinus grafts with concomitant implant placement

Este trabalho teve por objetivo avaliar o tecido ósseo periimplantar formado após o enxerto sinusal com hidroxiapatita e beta-tricálcio fosfato (HA + ß-TCP), nas apresentações em grânulos e em pasta, concomitante à instalação de implantes em coelhos. Trinta e quatro seios maxilares de coelhos foram enxertados com HA + ß-TCP, sendo metade do grupo grânulos e metade do grupo pasta. Concomitantemente, foi realizada a instalação de implantes. Aos 7 e 40 dias pósoperatórios, realizou-se a eutanásia dos animais, e as amostras foram preparadas para as análises tomográfica, microtomográfica, histológica (coloração por hematoxilina e eosina - HE), imunoistoquímica (marcação de fator de transcrição Runt-2 ­ RUNX2 ­, fator de crescimento endotelial vascular ­ VEGF ­, osteocalcina ­ OCN ­ e fosfatase ácida resistente ao tartarato ­ TRAP) e de torque de remoção dos implantes. Na tomografia, foi observada a manutenção da integridade da membrana sinusal, sem extravasamento de material, nos dois grupos e períodos. Parâmetros morfométricos de volume ósseo, porcentagem do volume ósseo e número de trabéculas foram significativamente superiores para o grupo pasta do que para o grupo grânulos aos 7 dias, enquanto que a porosidade foi maior para o grupo grânulos nesse mesmo período. Aos 40 dias, não houve diferença significativa entre os grupos para a maioria dos parâmetros microtomográficos estudados. Nos cortes histológicos corados por HE, observou-se que em ambos os grupos ocorreu a formação de tecido ósseo junto às espiras do implante aos 40 dias, favorecendo a osseointegração. Imunomarcações positivas semelhantes foram encontradas tanto para o fator de diferenciação osteoblástica RUNX2 quanto para o fator de mineralização OCN no osso neoformado nos dois grupos experimentais. A atividade osteoclástica evidenciada pela TRAP mostrou-se semelhante nos dois grupos, com discreto predomínio para o grupo grânulos. Já a marcação positiva para o VEGF mostrou-se aumentada no grupo grânulos, caracterizando um potencial osteocondutor superior nessa apresentação do biomaterial. Ademais, não houve diferenças nos valores de torque de remoção do implante entre ambos os grupos. Logo, as duas apresentações da HA + ß-TCP mostraram resultados favoráveis à osseointegração a longo prazo, com formação de tecido ósseo em quantidade e qualidade semelhantes junto aos implantes(AU)

This work aimed to evaluate the peri-implant bone tissue after maxillary sinus grafting with hydroxyapatite and beta-tricalcium phosphate (HA + ß-TCP), in granular and paste formulations, concomitant with implant placement in rabbits. Thirty four rabbit maxillary sinuses were grafted with HA + ß-TCP, being half of the granular group and half of the paste group. Concomitantly, the implant placement was performed. At 7 and 40 postoperative days, animals were euthanized, and the samples were prepared for tomographic, microtomographic, histological (hematoxylin and eosin staining), immunohistochemical (Runt-related transcription factor 2 ­ RUNX2, vascular endothelial growth factor ­ VEGF ­, osteocalcin ­ OCN ­ and tartrate-resistant acid phosphatase ­ TRAP ­ staining) and implant torque removal analyses. In computed tomography, the maintenance of sinus membrane integrity, with no material extravasation, was observed in both groups and periods. Morphometric parameters of bone volume, percentage of bone volume and trabecular number were significantly higher for paste than granular group at day 7, while the porosity was higher for granular group in this period. At day 40, there were no significant differences between both groups for the majority of the microtomographic parameters studied. In the HE-stained histological sections, it was observed that bone healing around implant threads occurred for both groups at day 40, enhancing osseointegration. Similar positive immunostainings were observed for both the RUNX2 osteoblastic differentiation factor and the OCN mineralization factor in the neoformed bone in the two experimental groups. The osteoclast activity evidenced by TRAP was similar in both groups, with a slight predominance for the granular group. Positive staining for VEGF growth factor was increased in the granular group, characterizing a superior osteoconductive potential for this biomaterial formulation. Besides, there were no differences in the values of implant removal torque between both groups. Thus, the two formulations o H + ß-TCP showed favorable osseointegration results in the long term, with similar amount and quality of bone tissue formation around the implants(AU)

Efeito de géis fluoretados suplementados com nanopartículas de trimetafosfato de sódio sobre a remineralização de lesões de cárie e sobre o desgaste dental erosivo in vitro / Effect of fluoride gels supplemented with nano-sized Sodium Trimetaphosphate on the remineralization of caries lesions and erosive dental wear in vitro

O presente estudo avaliou o efeito de géis fluoretados suplementados com Trimetafosfato de Sódio (TMP) sobre a remineralização de lesões de cárie artificial e sobre o desgaste erosivo do esmalte dental bovino in vitro. Para o 1º capítulo, blocos de esmalte (n=168) com lesões de cárie artificiais foram analisados por dureza de superfície (DS) e aleatoriamente divididos em 7 grupos (n=24/grupo), de acordo com os géis testados: Placebo (sem F/TMP), 4500 µg F/g (4500F), 9000 µg F/g (9000F), 4500F+2,5% TMP nanoparticulado (2,5% Nano), 4500F+5% TMP nanoparticulado (Nano 5%), 4500F+5% TMP microparticulado (Micro 5%) e 12300 µg F/g (Acidulado). Os blocos foram tratados uma única vez com os géis (1 minuto) previamente à ciclagem de pH (6 dias). Em seguida, foram determinadas a porcentagem de recuperação de DS (%RDS), a área integrada da lesão de subsuperfície (ΔKHN) e o conteúdo de flúor fortemente-ligado (F), CaF2, cálcio (Ca) e fósforo (Pi) formado (após a aplicação dos géis) e retido no esmalte (após a ciclagem de pH). Os dados foram submetidos a ANOVA e teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). Os grupos 2,5% Nano e 5% Micro alcançaram %RDS semelhante aos géis 9000F e Acidulado. Para ΔKHN, os maiores valores foram observados para os grupos Placebo e 5% Nano, e os menores, para 2,5% Nano, 5% Micro, 9000F e Acidulado. Todos os grupos tiveram valores semelhantes de CaF2 retido, exceto Placebo e Acidulado. Um aumento nas concentrações de Ca foi observado para os grupos com TMP nanoparticulado. Em relação ao Pi formado e retido, os grupos com TMP foram semelhantes ao 9000F e ao Acidulado. No 2º capítulo, blocos de esmalte (n=140) foram aleatoriamente distribuídos em 7 grupos, utilizando os mesmos géis e modo de aplicação descritos no 1º capítulo. Metade da superfície dos blocos foi protegida com esmalte ácido-resistente (área controle), expondo a outra metade ao tratamento com os géis e ao desafio erosivo (ERO) ou erosivo+abrasivo (ERO+ABR). Após a aplicação dos géis, todos os blocos (n=20/grupo) foram submetidos a ERO (imersão em ácido cítrico 0,05 M, pH 3,2, 90 segundos, 4 vezes/dia, 5 dias, sob agitação), enquanto metade dos blocos (n=10/grupo) foi adicionalmente submetida a escovação (15 segundos) após cada desafio erosivo (ERO+ABR). Os blocos foram analisados por perfilometria e dureza em secção longitudinal (perda da dureza em profundidade - ∆KHN). Os dados foram submetidos a ANOVA e teste de Fisher (p<0,05). Para ERO, o desgaste do esmalte associado a 2,5% Nano, 5% Nano e Acidulado foi significantemente menor que 4500F, enquanto que para ERO+ABR o menor desgaste de esmalte foi observado para 5% Nano. Entre os géis com TMP, os menores valores de ∆KHN foram observados para 2,5% Nano para ERO. Os resultados permitem concluir que a adição de TMP nanoparticulado a 2,5% ou TMP microparticulado a 5% ao gel 4500F aumentou significativamente a remineralização de lesões artificiais de cárie in vitro. Quanto ao efeito sobre o desgaste dental erosivo, a adição de 5% de TMP nanoparticula do ao gel 4500F produziu efeitos protetores superiores quando comparado ao TMP microparticulado(AU)

The present study evaluated the effect of fluoride gels supplemented with sodium trimetaphosphate (TMP) on the remineralization of caries-like lesions and on erosive wear of bovine enamel in vitro. For the first chapter, enamel blocks (n=168) with caries-like lesions were evaluated by surface hardness (SH), and randomly divided into 7 groups (n=24/group), according to the tested gels: (a) Placebo (no F/TMP), 4,500 µg F/g (4500F), 9,000 µg F/g (9000F), 4,500F+2.5% nano-sized TMP (2.5% Nano), 4,500F+5% nano-sized TMP (5% Nano), 4,500F+5% micrometric TMP (5% Micro) and 12,300 µg F/g (Acid gel). Gels were applied on the blocks only once (1 minute) with the gels prior to the pH-cycling regimen (6 days). Following, the percentage of SH recovery (%SHR), integrated subsurface hardness area (ΔKHN), and firmly-bound fluoride (F), CaF2, calcium (Ca) and phosphorus (Pi) formed (after gels application) and retained (after pH cycling) in/on enamel were determined. Data were submitted to ANOVA and Student-Newman-Keuls test (p<0.05). The 2.5% Nano and 5% Micro groups reached %SHR similar to the 9000F and acid gel. For ΔKHN, the highest values were observed for the Placebo and Nano 5% groups, and the lowest, for 2.5% Nano, Micro 5%, 9000F and Acid gel. All groups had similar values of CaF2 retained on enamel, except Placebo and Acid gel. An increase in Ca concentrations was observed for the groups treated with nano-sized TMP. Regarding Pi formed and retained, groups treated with TMP were similar to 9000F and Acid gels. In the second chapter, the enamel blocks (n=140) were randomly divided in 7 groups, using the same gels and mode of application described in the first chapter. Half of the blocks' surface was protected with acidresistant varnish (control area), exposing the other half to the treatment with gels and to erosive (ERO) or erosive+abrasive (ERO+ABR) challenges. After treatment with the gels, all blocks (n=20/group) were submitted to ERO (immersion in 0.05 M citric acid, pH 3.2, 90 seconds, 4 times/day, 5 days, under agitation), while half of the blocks (n=10/group) was additionally subjected to brushing (15 seconds) after each erosive challenge (ERO+ABR). The blocks were evaluated by profilometry and cross-sectional hardness (integrated hardness loss in depth - ΔKHN). Data were submitted to ANOVA and Fisher's test (p<0.05). For ERO, enamel wear associated with 2.5% Nano, 5% Nano and Acid gels was significantly lower than 4500F, whereas for ERO+ABR the lowest enamel wear was observed at 5% Nano. Among the TMP gels, the lowest ΔKHN values were observed at 2.5% Nano under ERO conditions. The results allow to conclude that the addition of 2.5% nano-sized TMP or 5% micrometric TMP to the 4500F gel significantly increased the remineralization of artificial caries lesions in vitro. As for the effect on erosive tooth wear, the addition of 5% nanosized TMP to the 4500F gel produced superior protective effects when compared to micrometric TMP(AU)

Efeito do trimetafosfato de sódio, associado ou não ao fluoreto, na biomassa e fluido do biofilme misto contendo Streptococcus mutans e Candida albicans / Effect of sodium trimetaphosphate, associated or not to fluoride, on biomass and fluid of mixed biofilm containing Streptococcus mutans e Candida albicans

O presente estudo teve por objetivo verificar o efeito do trimetafosfato de sódio (TMP), associado ou não ao fluoreto (F), sobre células cultiváveis, biomassa total, atividade metabólica e composição da matriz extracelular de biofilmes mistos de S. mutans e C. albicans, bem como sobre as concentrações de F, cálcio (Ca) e fósforo (P) (biofilme total e fluido do biofilme) e no pH destes biofilmes formados in vitro. Para ambos os estudos, os biofilmes foram formados em poços de placas de microtitulação, colocando uma suspenção (1x107 células/mL C. albicans + 1x108 células/mL S. mutans) em saliva artificial suplementada com sacarose (0,4%), a qual tinha metade de seu conteúdo renovada a cada 24 horas. Os biofilmes foram tratados três vezes (72, 78 e 96 horas de formação), por um minuto, com soluções contendo TMP (0,25, 0,5 ou 1%) com ou sem 500 ppm F, além de soluções contendo 500 e 1100 ppm F, adotadas como controles positivos. A saliva artificial foi utilizada como tratamento e considerada como controle negativo. Para o estudo mircrobiológico, após o terceiro tratamento foram realizados os testes de quantificação de células cultiváveis (CFU), biomassa total (teste colorimétrico de cristal violeta ­ CV), atividade metabólica (redução de XTT) e quantificação dos componentes da matriz extracelular (proteína, carboidrato e DNA). Todos os ensaios foram realizados em triplicata, em três ocasiões diferentes. Os resultados foram submetidos à análise de variância a um critério, seguida pelo teste Fisher LSD (p<0,05). O TMP apresentou efeito redutor principalmente no metabolismo e nos0020 componentes da matriz extracelular do biofilme. Para o estudo da concentração de F, Ca, e P, após o período de tratamento, estes foram analisados no biofilme total e no fluido do biofilme após a mensuração do pH do biofilme. Em outro conjunto de experimentos, após o terceiro tratamento (96 h de formação de biofilme) o biofilme foi exposto, por 3 minutos, à solução de sacarose a 20%. Esta foi removida e, após 1 minuto, analisou-se o pH do meio e as concentrações de F, Ca, e P tanto na biomassa como no fluido do biofilme. Os dados foram submetidos a análise de variância a dois critérios, seguida pelo teste de Fisher LSD (p<0,05). O tratamento com TMP aumentou a concentração de F e P no fluido do biofilme, além de manter o pH do meio mais próximo do neutro, mesmo após a exposição do biofilme à sacarose. Assim, é possível concluir que o TMP interfere no metabolismo, composição orgânica e inorgânica, bem como no pH do biofilme testado(AU)

The aim of the present study was to verify the effect of sodium trimetaphosphate (TMP), associated or not to fluoride (F), on cultivable cells, total biomass, metabolic activity and composition of the extracellular matrix of mixed biofilms of S. mutans and C. albicans, as well as on the concentrations of F, calcium (Ca) and phosphorus (P) (total biofilm and biofilm fluid) and pH of these biofilms formed in vitro. For both studies, the biofilms were formed in wells of microtiter plates by placing a suspension (1 x 107 cells/mL C. albicans + 1x108 cells/mL S. mutans) in artificial saliva supplemented with sucrose (0,4%), which had half of its content renewed every 24 hours. Biofilms were treated three times (72, 78 and 96 hours of formation), for one minute, with solutions containing TMP (0.25, 0.5 or 1%) with or without 500 ppm F, as well as solutions containing 500 and 1100 ppm F, adopted as positive controls. Artificial saliva was used as treatment and considered as the negative control. For the microbiological study, the following tests were performed: quantification of cultivable cells (CFU), total biomass (colorimetric crystal violet test - CV), metabolic activity (XTT reduction) and quantification of matrix components (protein, carbohydrate and DNA). All assays were performed in triplicate on three different occasions. The results were submitted to one-way analysis of variance, followed by the Fisher LSD?s test (p<0.05). TMP showed a reducing effect mainly on the metabolism and components of the extracellular matrix of the biofilm. For the study of the concentrations of F, Ca, and P, these ions were analyzed in the total biofilm and in the biofilm fluid after treatment with the test solutions and after the pH measurement of the biofilm. In another set of experiments, after the third treatment (96 h of biofilm formation), the biofilms were exposed for 3 minutes to a 20% sucrose solution. This was removed and after 1 minute the biofilms were collected, and the pH of the medium and F, Ca, and P concentrations were determined both in the biomass and in the biofilm fluid. The data were submitted by two-way analysis of variance, followed by Fisher LSD's test (p<0.05). Treatment with TMP increased F and P concentration of the biofilm fluid, and maintained the pH of the medium close to neutral values even after exposure of the biofilm to sucrose. Thus, it is possible to conclude that TMP interferes with the metabolism, organic and inorganic composition and the pH of the biofilm tested(AU)

Avaliação in vitro da energia livre de superfície da dentina após tratamento com trimetafosfato de sódio associado ou não ao fluoreto, exposto ou não ao cálcio / In vitro evaluation of free surface energy of dentin after treatment with sodium trimetaphosphate associated or not to fluoride, exposed or not to calcium

O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro a energia livre de superfície (Æ´S) da dentina após tratamento com trimetafosfato de sódio (TMP) associado ou não ao fluoreto (F), exposto ou não ao cálcio (Ca), bem como, a adsorção de TMP, F e Ca na dentina. Blocos de dentina bovino (4 mm x 4 mm, n=12 blocos/grupo) foram tratados por meio da imersão em soluções contendo TMP nas concentrações: 0%; 1%; 3% e 9% seguido da aplicação ou não de Ca. Estas concentrações de TMP foram associadas ou não ao F na concentração de 1100 ppm F. Foram determinadas as concentrações de F, Ca e TMP nas soluções antes e após o tratamento para calcular a adsorção destes a dentina. Para analisar a energia livre de superfície (Æ´S) da dentina, os componentes apolar (Æ´S LW) e polar (Æ´S AB) eram determinados após os tratamentos por meio da medida do ângulo de contato. Os dados foram submetidos à análise de variância a dois critérios seguidos pelo teste Student-Newman-Keuls (p<0,05). O TMP reduziu a Æ´S da dentina e aumentou os sítios doadores de elétrons (Æ´S- ). Houve correlação positiva entre a adsorção de TMP e os valores de Æ´S- (Pearson's r=0,801; p<0,001). Maiores valores de Æ´S- levou a maior adsorção de Ca (p< 0,001). A associação F/TMP não alterou a Æ´S e Æ´S LW e reduziu os valores de Æ´S-, entretanto houve maior adsorção de Ca. Houve correlação positiva entre a adsorção de TMP e F (Pearson's r=0,871; p< 0,001). Concluiu-se que o TMP aumentou a Æ´S- e adsorção de Ca, e reduziu a Æ´S. A associação com o F aumentou a adsorção de TMP sem aumentar a Æ´S-, porém houve maior adsorção de Ca(AU)

The objective of this study was to evaluate in vitro the free surface energy (Æ´S) of dentin after treatment with sodium trimetaphosphate (TMP) associated or not to fluoride (F), exposed or not to calcium (Ca), as well as the adsorption of TMP, F and Ca in dentin. Bovine dentin blocks (4 mm x 4 mm, n=12 blocks/group) were treated by immersion in solutions containing TMP at concentrations: 0%; 1%; 3% and 9% followed or not by the application of Ca. These concentrations of TMP were or not associated with F at the concentration of 1100 ppm F. Concentrations of F, Ca and TMP were determined in the solutions before and after the treatment to calculate the adsorption to the dentin. To analyze the free surface energy (Æ´S) of the dentin, the apolar (Æ´S LW) and polar (Æ´S AB) components were determined after the treatments by means of the contact angle measurement. Data were submitted to analysis of variance at two criteria followed by the Student-Newman-Keuls test (p< 0.05). The results showed that TMP reduces Æ´S of dentin and increases electron donor sites (Æ´S- ). There was a positive correlation between the adsorption of TMP and the values of Æ´S- (Pearson's r=0.801; p< 0.001). Higher values of Æ´S- led to higher adsorption of Ca (p< 0.001). The F/TMP association did not change Æ´S and Æ´S LW and reduced the values of Æ´S- , but the adsorption of calcium was higher. There was a positive correlation between the adsorption of TMP and F (Pearson's r=0.871, p< 0.001). TMP increased Æ´S- and Ca adsorption, and reduced Æ´S. The association with F increased the adsorption of TMP without increasing Æ´S- , however there was higher adsorption of Ca(AU)

Desenvolvimento de protocolo in vitro do processo erosivo do esmalte e efeito de enxaguatório bucal fluoretado associados ao trimetafosfato nanoparticulado contra a erosão / Development of an in vitro protocol for the assessment of initial enamel erosion and effect of a fluoridated mouthrinse associated with nanosized trimetaphosphate against erosion

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de enxaguatórios bucais fluoretados, suplementados ou não com trimetafosfato de sódio (TMP) micrométrico ou nanoparticulado, sobre a erosão do esmalte dental, utilizando uma boca artificial. Material e Métodos: 120 blocos de esmalte bovino foram aleatoriamente distribuídos em 5 grupos, de acordo com os seguintes enxaguatórios: Placebo (sem flúor ou TMP), 100 ppm F, 225 ppm F, 100 ppm F + 0,2% TMP microparticulado e 100 ppm F + 0,2% de TMP nanoparticulado. Os blocos foram subdivididos em 2 condições de experimento (1 ou 3 dias). Cada ciclo erosivo consistiu de 7 exposições a ácido cítrico ( a cada 4 s), alternadas com 6 exposições a saliva artificial (a cada 7 s), três vezes ao dia. O tratamento com os enxaguatórios bucais foi realizado após o primeiro e último ciclo erosivo de cada dia, durante 1 min. Os blocos foram analisados por perfilometria, dureza de superfície e em secção longitudinal, bem como por energia livre de superfície (s). Os dados foram analisados por ANOVA a 2 critérios, teste de Student-Newman-Keuls e coeficiente de correlação de Pearson (p<0,05). Resultados: De forma geral, um efeito protetor significativamente maior foi observado para os enxaguatórios bucais contendo TMP em relação à dureza e ao desgaste do esmalte, com um efeito adicional para o uso de nanopartículas. Houve uma moderada correlação entre a dureza de superfície e em secção longitudinal (r = -0,533; p<0,001). Em acréscimo, uma redução da s e de seu componente apolar (γs LW) e sítios doadores de elétrons (γ¯) foram observados nos grupos tratados com enxaguatórios contendo TMP. Além disso, diferenças significativas foram observadas para a maioria das variáveis analisadas com relação à duração do protocolo erosivo (1 e 3 dias). Conclusões: o tratamento com enxaguatórios bucais contendo TMP reduziu significativamente o desgaste erosivo do esmalte e a perda mineral deste em comparação aos enxaguatórios sem TMP, e tais efeitos podem ser relacionados a mudanças nos parâmetros de s analisados. A boca artificial utilizada no estudo mostrou-se adequada para o estudo do desgaste erosivo do esmalte em condições in vitro(AU)

The aim of the present study was to evaluate the effect of fluoride mouthrinses, supplemented or not with sodium trimetaphosphate (TMP), on the dental erosion of the enamel using an artificial mouth. Material and Methods: 120 blocks of bovine enamel were randomly distributed in 5 groups according to the following mouthrinses: Placebo (without fluoride or TMP), 100 ppm F, 225 ppm F, 100 ppm F + 0.2% TMP micrometric and 100 ppm F + 0.2% nanosized TMP. The blocks were subdivided into 2 experimental treatments (1 or 3 days). Each erosive cycle consisted of 7 exposures to citric acid (each 4 s), alternated with 6 exposures to artificial saliva (each 7 s), three times a day. Treatment with mouthrinses was performed after the first and last erosive cycle of each day for 1 min. The blocks were analyzed by profilometry method, surface hardness and longitudinal section analyses, as well as surface free energy (s). Data were analyzed by two way ANOVA, StudentNewman-Keuls test and Pearson's correlation coefficient (p<0.05). Results: In general, a significantly greater protective effect was observed for mouthrinses containing TMP in relation to the hardness and wear of the enamel, with an additional effect for the use of nanoparticles. There was a moderate correlation between surface hardness and longitudinal section (r = -0.533; p<0.001). In addition, a reduction of s and its apolar component (s LW) and electron donor sites (γ¯) were observed in the groups treated with TMP containing mouthrinses. In addition, significant differences were observed for most of the variables analyzed in relation to the duration of the erosive protocol (1 and 3 days). Conclusions: The treatment with mouthrinses with TMP reduced significantly the erosive enamel wear and the mineral loss compared to non-TMP mouthrinses, and such effects may be related to changes in the s parameters. The artificial mouth used in this study was adequate for the enamel erosive studies under in vitro conditions(AU)